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脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染試劑

簡要描述:脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染試劑
Lip2000 是一種新型的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑。適合于將核酸(DNA 和 RNA)轉(zhuǎn)染入真核細胞,具有低細胞毒性;對多種類型的細胞和培養(yǎng)板都具有高轉(zhuǎn)染效率;轉(zhuǎn)染時血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率的優(yōu)點。適用范圍:貼壁細胞和懸浮細胞(脯乳動物細胞系)的轉(zhuǎn)染。

  • 產(chǎn)品型號:C6031
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2025-02-24
  • 訪  問  量: 653

詳細介紹

品牌Bioss貨號C6031
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染試劑

保存條件 2-4℃保存一年(避免冷凍)。

脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染試劑

產(chǎn)品簡介:

Lip2000 是一種新型的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑。適合于將核酸(DNA 和 RNA)轉(zhuǎn)染入真核細胞,具有低細胞毒性;對多種類型的細胞和培養(yǎng)板都具有高轉(zhuǎn)染效率;轉(zhuǎn)染時血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率的優(yōu)點。適用范圍:貼壁細胞和懸浮細胞(脯乳動物細胞系)的轉(zhuǎn)染。



質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染:

對大多數(shù)細胞來說,DNA(µg)與 Lip2000(µI)的比例為 1:2~3。轉(zhuǎn)染時高的細胞密度可以得到高的轉(zhuǎn)染效率和表達水平,并能減少細胞毒性。

1.  以 24 孔板為例

a.  貼壁細胞:轉(zhuǎn)染前一天,用 500 µI 不含抗生素的培養(yǎng)基接種 0.5-2×10

5 細胞,使之第二天能達到 70- 90%匯合。

b.  懸浮細胞:在準備 DNA-Lip2000 復(fù)合物之前,用 500 µI 不含抗生素的培養(yǎng)基接種 4-8×10

5 細胞即可。

2.  對每個轉(zhuǎn)染樣品,進行以下操作

a.  在eppendorf管里分別加入50 µI Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA,輕柔混勻,制成DNA稀釋液。

b.  在另一個eppendorf管里分別加入50 µI Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和2.0 µI Lip2000(注意用前 先混 勻),輕柔混勻,制成Lip2000 稀釋液,室溫靜置5分鐘。

c.  將DNA稀釋液和Lip2000稀釋液混合,輕柔混勻,室溫靜置20分鐘,形成DNA-Lip2000復(fù)合物。DNA-Lip2000復(fù)合物在室溫下可穩(wěn)定存在6小時。

3.  將DNA-Lip2000復(fù)合物加入到接種好的細胞中,將培養(yǎng)板輕輕地前后搖動,使復(fù)合物分散均勻。

4.  在37℃ 二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4-6小時后更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)18-48小時。

5.  如果要篩選穩(wěn)定細胞株,則在轉(zhuǎn)染24小時后將細胞按照1:10或更高的比例接種到新鮮培養(yǎng)基中,第二天加入選擇性培養(yǎng)基進行篩選。


質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的優(yōu)化為達到最高的轉(zhuǎn)染效率和降低細胞毒性的影響,可以對DNA和Lip2000的比例以及細胞密度進行優(yōu)化,一般在1: 0.5~5的范圍內(nèi)優(yōu)化DNA (µg)和Lip2000(µI)的比例。





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